狗狗有没有狂犬病毒检查？
目前，我国尚未批准家养动物的狂犬病抗体检测试剂。由于缺乏相应的检测手段，临床上对犬的狂犬病诊断主要依据临床症状和流行病学资料进行综合判断。 狂犬病是一种人畜共患病，是由狂犬病病毒引起的急性传染病，主要通过咬伤或感染而传播。人类一旦感染上该病，病死率几乎达100%，是目前世界上病死率最高的疾病之一[1]；猫、狗等动物发病后死亡率也很高[2-3]。因此，及时准确地给犬只做出狂犬病诊断，是防控该病的首要任务。 目前，世界卫生组织推荐了犬的狂犬病临床诊断方法，包括神经组织培养、中和试验、免疫荧光法及酶标免疫分析等方法[4]。由于这些方法所需仪器设备比较复杂且成本较高，难以普及到全国范围。
由于狂犬病潜伏期的长短受多种因素影响，所以犬的潜伏期无法精确测定，导致临床诊断较为困难。
一、间接血液凝集反应（IHA） IHA是用凝集素与红细胞表面抗体反应来测量血清中特异性抗体的浓度，在免疫学检验中是应用最为广泛的一种方法[5]。其原理为红细胞的抗原表位被特异性抗体结合后会导致红细胞发生聚集，从而使得红细胞的悬浮液由均匀的透明状态变为不透明的乳浊状或者絮状沉淀。
IHA的优点在于灵敏度高，可以检测到1.0 IU/mL浓度的抗体，适用于大量样品的检测；操作简便迅速，可在数小时内完成整个实验过程，适合大批量样品的现场快速检测；价格低廉，适合基层单位使用。 缺点在于可检出抗体类型单一，无法区分IgM和IgG；对血清中IgG亚类的鉴定也较为困难；易受到非特异性干扰物质的影响；结果受外界因素的影响较大，易出现假阳性现象。
二、酶联免疫吸附试验（ELISA） ELISA是在底物存在的条件下，将酶标记抗体与抗原特异性竞争性结合而建立的一种定量检测抗原或抗体的敏感、特异的分析技术。根据被检测物的性质不同可分为定性ELISA和定量ELISA两种。其中，定量ELISA又分为双抗原夹心法、双抗体夹心法和竞争抑制法三种基本类型[6]。
与其它检测方法的比较见下表。 三、蛋白免疫印迹（Western blotting） 蛋白印迹技术是根据抗原与抗体能够特异性结合的原理发展起来的一项分子生物学技术在免疫反应过程中，当有相应免疫球蛋白参与时，B细胞受到刺激后会增殖分化成浆细胞，产生大量特异性的抗体，这些抗体可与对应的抗原特异性结合形成免疫复合物。随后，免疫复合物会沉积于血管中而引起局部炎症反应。为了去除多余的免疫复合物，巨噬细胞会吞噬并清除它们[7]。 在Western blotting中，首先需要制备一个标准品曲线，然后在一定量的稀释度下分别取标准品及其抗体进行杂交，最后通过对比标准品的吸光值来确定待测蛋白的浓度大小。 四、免疫荧光染色 免疫荧光分析是将待检标本与特定标记的二抗孵育，然后加入已知荧光强度的荧光素标记抗酶抗体，再对其进行染色。通过对荧光信号强度进行分析，可以推算出待检标本中的二价抗体含量的高低。 此操作方法可用于检测唾液中的抗体水平，具有操作简单、快捷等特点[8]。 五、实时荧光定量PCR (real time PCR) realtime PCR是一种用于检测微小核酸（microRNA， miRNAs）的聚合酶链式反应(polymerase chain reaction， PCR)， 可应用于临床样本中小RNA分子的检测和定量研究。 与常规PCR相比，realtime PCR具有许多优点，主要包括高灵敏度、特异性强以及重复性好，并且可以实时监测引物与模板的结合情况，使扩增效率更为准确。还可以实现对微量的RNA分子进行定量和分选，从而对靶基因的表达情况进行更深入的分析和探讨 [9]。 六、数字聚合酶链式反应DNA芯片 基于生物芯片技术的数字聚合酶链式反应 DNA芯片技术结合了芯片技术与基因芯片的特点，不仅拥有后者高通量和高信息获取率的优势，而且克服了其成本高、生产周期长的缺陷，是当前基因芯片研究中最为热门的技术之一[10]。
七、测序 如果血清中含有特异性抗体，则说明犬已经暴露于狂犬病病毒，此时应该尽快接种狂犬病疫苗以预防狂犬病的发生。如果血清中没有发现病毒的特异性抗体，则需要确定犬是否曾经接触过狂犬病病毒或其他类似病原微生物。 总之，抗体检测方法的应用越来越广泛，但不同的实验室应根据实际情况合理选用合适的抗体检测方法。对于大型宠物医院来说，建议同时开展以上几种抗体检测的方法，以满足不同客户的需求。